Скрытая кровь в кале, количественно (метод FOB Gold)

Иммунологический метод количественного определения в кале, который позволяет диагностировать незначительное скрытое кровотечение из нижних отделов желудочно-кишечного тракта.

Синонимы русские

Скрытая кровь в кале (количественный иммунохимический метод).

Синонимы английские

FOB Gold Test, Immunological faecal occult blood test (iFOBT).

Метод исследования

Иммунохимический метод.

Единицы измерения

Нг/мл (нанограмм на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.), за 72 часа до сбора кала.
• Исследование проводить перед выполнением ректороманоскопии и других диагностических манипуляций в области кишечника и желудка или не менее чем через 2 недели после таковых.

Общая информация об исследовании

Колоректальный рак – один из самых распространенных видов опухолей как по частоте заболеваемости, так и по летальным исходам. Он занимает второе место по смертности среди злокачественных новообразований у мужчин и женщин. Каждый год регистрируется более 1 миллиона новых случаев заболевания во всем мире, а ежегодная смертность превышает 500 000. Риск развития заболевания увеличивается с возрастом, 90 % заболевших – это население в возрасте более 55 лет. По эпидемиологическим данным, наследственность является причиной развития колоректального рака у 5-30 % больных. К наследственным синдромам, при которых значительно повышается риск заболеть им, относятся семейный аденоматозный полипоз, синдром Линча, ювенильный полипоз и некоторые более редкие состояния. 5-тилетняя выживаемость пациента зависит от стадии рака на момент диагностики.

Колоректальный рак развивается медленно, в течение нескольких лет. Опухоль нередко возникает в результате преобразования полипа слизистой оболочки кишечника. Данный процесс может занимать от 8 до 12 лет. Не все виды полипов способны превращаться в опухоль, однако их наличие, особенно в больших количествах, существенно увеличивает риск развития колоректального рака. К другим предраковым состояниям относится дисплазия, которая характерна для людей с язвенным колитом , болезнью Крона.

При колоректальном раке кровь с каловыми массами может выделяться задолго до первых симптомов болезни. Скрининговое исследование кала на скрытую кровь среди людей из групп риска помогает вовремя диагностировать болезнь и снизить смертность от колоректального рака на 15-33 %. Эффективность такого скрининга подтверждена несколькими исследованиями.

Для выявления скрытой крови в кале наиболее часто используются гваяковая или бензидиновая пробы, однако для их проведения требуется строгое выполнение некоторых правил, в частности соблюдение диеты за несколько дней до исследования. Кроме того, в отличие от гваяковой пробы современные иммунохимические методы обладают высокой чувствительностью и специфичностью.

Доказано, что иммунологический тест на скрытую кровь в кале (FOB) – это самый удобный тестовый метод, благодаря простоте и эффективности работы с пациентами. Он позволяет точно определить количество гемоглобина (НЬ) в кале, при этом пациентам не требуется соблюдать диету или менять свой образ жизни. Метод основан на реакции агглютинации антиген-антитело между присутствующим в образце гемоглобином человека и анти-гемоглобин-антителом на латексных частицах. Агглютинация измеряется как увеличение при абсорбции в 570 нм, единица которой пропорциональна количеству гемоглобина человека в образце. При исследовании определяется скрытая кровь, которая попала в просвет кишечника в нижних отделах желудочно-кишечного тракта, так как гемоглобин из верхних отделов разрушается при прохождении через пищеварительный тракт.

Положительный результат анализа требует дальнейшего обследования для уточнения причин, так как источником незначительной кровопотери может служить доброкачественный полип, дивертикул , геморрой или воспалительные заболевания кишечника . Тест на скрытую кровь положителен в среднем у 1-5 % людей, из них у 2-10 % выявляется рак, а у 20-30 % – аденоматозные полипы толстой кишки. При положительной реакции на скрытую кровь проводится дополнительное обследование в целях обнаружения рака, полипа или другой причины, вызывающей кровотечение. Для подтверждения диагноза больным при отсутствии противопоказаний назначается колоноскопия, сигмоскопия или рентгенография с двойным контрастированием. Отсутствие крови в кале не позволяет полностью исключить возможность наличия колоректального рака, поэтому лицам с высоким риском (при семейном анамнезе) рекомендована эндоскопия даже при отрицательном результате анализа.

Для чего используется исследование?

• Для скрининга рака толстой и прямой кишки.
• Для диагностики кровотечения из нижних отделов желудочно-кишечного тракта при некоторых доброкачественных и воспалительных заболеваниях (полипы толстого кишечника, болезнь Крона, язвенный колит, геморрой).

Когда назначается исследование?

• При профилактическом ежегодном обследовании лиц в возрасте 50-75 лет.
• При подозрении на скрытое кишечное кровотечение.

Что означают результаты?

Референсные значения: 0 - 50 нг/мл.

Положительный результат указывает на незначительное кровотечение из нижних отделов желудочно-кишечного тракта. Для уточнения причины кровотечения необходимы эндоскопические методы диагностики (сигмоскопия, колоноскопия).

Возможные причины положительного результата:

• рак толстой или прямой кишки,
• полипы и аденомы толстого кишечника,
• воспалительные заболевания толстого кишечника (болезнь Крона, язвенный колит),
• дивертикулез кишечника,
• геморрой.

Отрицательный результат не может полностью исключить возможность наличия колоректального рака.

Описание

Метод определения Иммунохимический (FOB Gold). Метод специфичен по отношению к человеческому гемоглобину.

Исследуемый материал Кал

Доступен выезд на дом

Колоректальный рак.

Актуальность проблемы.

профилактика

колоректального рака.

Чувствительный, специфичный в отношении человеческого гемоглобина тест, направленный на выявление кровотечений нижних отделов кишечного тракта, используемый в алгоритмах скрининга на колоректальный рак.

Предлагаемый новый иммунохимический вариант теста на скрытую кровь в кале предназначен для диагностики скрытых кровотечений из нижних отделов желудочно-кишечного тракта. Новый метод лишен недостатков старых, менее специфичных химических методов (гваяковая, бензидиновая пробы). Эти химические пробы на гемоглобин давали положительную реакцию не только на гемоглобин человека, но и на гемоглобин и миоглобин животного происхождения, поступающий с пищей, а также на некоторые химические вещества, содержащиеся в пищевых продуктах, витаминах, поэтому требовали строгой преаналитической подготовки к исследованию в течение нескольких дней перед исследованием. Иммунохимический вариант теста на скрытую кровь в кале строго специфичен по отношению к гемоглобину человека, он существенно более удобен, поскольку не требует ограничений в диете. Иммунохимический вариант теста на скрытую кровь в кале направлен на выявление различных видов патологии нижних отделов желудочно-кишечного тракта, характеризующихся кровотечениями (полипы толстого кишечника, колоректальный рак, болезнь Крона, язвенный колит). Сосуды на поверхности колоректального полипа или злокачественного новообразования часто бывают хрупкими и легко повреждаются при прохождении каловых масс. При этом в фекалии выделяется небольшое количество крови, которое редко заметно на глаз. Результат теста не несет информацию о том, в какой части пищеварительного тракта имеет место кровотечение и чем оно вызвано. Поэтому в случае положительного результата теста рекомендуют провести колоноскопию, чтобы понять причину появления крови в кале (полип, рак, язвы, геморроидальные узлы, дивертикулез, воспалительные заболевания кишечника). В иммунохимических тестах на скрытую кровь используют антитела к интактному человеческому гемоглобину и глобину (в отличие от пероксидазных проб, гваяковой и бензидиновой, в основе которых лежит реакция с гемом). Поэтому иммунохимический метод, проявляя более высокую чувствительность и специфичность в выявлении кровотечений на уровне ободочной и прямой кишки, в то же время нечувствителен к скрытым кровотечениям в верхних отделах желудочно-кишечного тракта, где белковая часть гемоглобина подвергается перевариванию (в отношении кровотечений в верхних отделах более чувствителен тест ). Колоректальный рак (рак ободочной и прямой кишки) - одна из наиболее частых причин смертности от онкологических заболеваний в России, как и в других европейских странах. Раннее выявление этой патологии кардинально влияет на прогноз заболевания. Доказана целесообразность применения тестов на скрытую кровь в кале в скрининговых программах для раннего выявления колоректального рака, с рекомендацией последующей колоноскопии при положительном результате теста. Такой алгоритм скрининга населения, по оценкам, позволяет снизить смертность от этого заболевания на 25%. В возрасте после 50 лет (а в группе риска, в случае наследственной предрасположенности после 40-45 лет) такое исследование целесообразно проводить ежегодно. Более информативно 2-3-кратное взятие проб кала. По оценкам, около трети пациентов на стадии, когда опухоль еще не выходит за пределы слизистой оболочки (по классификации Dukes A) могут быть не обнаружены при единичном скрининговом тесте на скрытую кровь в кале. Результаты исследования следует трактовать в комплексе с результатами других видов исследования, анамнезом и клинической картиной.

Литература

1. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России. Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, том 22, №3 (85), прил.1.Июль-сентябрь 2011 г. 172 с.
2. Z.Levl et al A quantitative immunochemical fecal occult blood test for colorectal neoplasia.Ann.Int.Med. 2007 146 244-255.
3. D.K.Sohn et al. Single immunochemical fecal occult blood test for detection of colorectal neoplasia. Cancer Research and Treatment. 2005. 37(1). 20-23
4. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006,1798
5. Всемирная организация здравоохранения

Подготовка

Специальных ограничений диеты не требуется. В случае применения препаратов, повышающих риск кровотечений (например, нестероидные противовоспалительные препараты) следует обсудить порядок проведения исследования с лечащим врачом. Исследование не следует проводить в течение 2 недель после проведения инструментальных исследований желудочно-кишечного тракта или медицинских процедур, которые могут вызвать механические повреждения слизистой (например, колоноскопия, ректороманоскопия, очищение кишечника с помощью клизм и пр.). Стул должен быть без клизм и слабительных средств. Не рекомендуется собирать кал из унитаза. Собирают кал на чистую поверхность, в качестве которой может быть использован сухой чистый лист бумаги, полиэтилен, или клеенка. Помещают пробу в контейнер для кала в количестве не более 1/3 объёма контейнера. Доставить в медицинский офис ИНВИТРО в день сбора пробы (или не позднее 12-часового периода после дефекации). До транспортировки материал должен храниться в холодильнике при +4...+8°С.

Показания к назначению

1. Скрининговый тест при определении группы риска наличия колоректального рака. 2. Диагностика других видов патологии нижних отделов пищеварительного тракта, связанных с кровотечениями (полипы толстого кишечника, язвенный колит, болезнь Крона). Важно! Этот метод не позволяет обнаружить скрытые кровотечения из верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Поэтому при выборе теста на скрытую кровь необходимо проконсультироваться с врачом.

Описание Подготовка Показания Интерпретация результатов

Данное исследование направлено на выявление кровотечений из нижних отделов желудочно – кишечного тракта. Концентрация фекального гемоглобина и трансферрина, определяемая с помощью количественного иммунохимического метода FOB Gold (quantitative immunochemical Fecal Occult Blood Test FOB Gold) имеет большие преимущества перед широко распространенной ранее стандартной методикой качественного анализа кала на скрытую кровь. Известный тест «кал на скрытую кровь» с использованием менее специфичных химических тестов все-таки имеет ряд недостатков, таких как положительная реакция на гемоглобин и миоглобин животного происхождения, поступающий с пищей, а также на некоторые вещества. Это определяет необходимость соблюдения диеты перед сдачей анализа на гемоглобин в кале . Новый вариант данного теста с использование иммунохимических реакций является более чувствительным и строго специфичным к человеческому гемоглобину, что исключает необходимость диеты перед анализом на гемоглобин в кале. Помимо этих достоинств новый метод определения концентрации фекального гемоглобина и трансферрина (анализ на гемоглобин в кале, анализ на трансферрин в кале ) является потенциальным онкомаркером, то есть может быть использован для диагностики предраковых поражений кишечника и ранней диагностики колоректального рака.

Определение концентрации фекального трансферрина, или анализ на трансферрин в кале, в комбинации с количественным определением гемоглобина в кале – анализ , имеющий сегодня самую высокую диагностическую чувствительность при обследовании пациентов с раком и предраковыми процессами толстого кишечника и прямой кишки.

Количественный анализ на трансферрин в кале иммунохимическим методом позволяет прогнозировать вероятность, стадию и локализацию предракового и ракового патологического процесса. Поэтому сегодня доказана целесообразность использования иммунохимического анализа на гемоглобин в кале, анализа на трансферрин в кале в качестве скрининга колоректального рака, ставшего довольно актуальной проблемой, учитывая возросшую частоту заболевания и бессимптомное течение рака.

Количественный анализ на трансферрин и гемоглобин в кале показан при диагностике заболеваний, связанных с воспалительными, аутоиммунными, язвенными процессами в слизистой оболочки нижний отделов желудочно – кишечного тракта.

Сдать анализ на гемоглобин и трансферрин в кале в качестве дополнительного исследования по показаниям предлагается при хроническом геморрое, глистных инвазиях, перенесенных бактериальных или вирусных кишечных инфекций.

Повышенное содержание трансферрина в кале при анализе свидетельствует о преимущественном поражении верхних отделов кишечника, а гемоглобина – нижних. При выявлении высоких значений обоих показателей наиболее вероятно обширное поражение кишечника.

Исследования на трансферрин и гемоглобин являются альтернативой колоноскопии. Анализ позволяет проводить отбор пациентов, нуждающихся в колоноскопии. В случае нормальных значений колоноскопия не проводится, решение о проведении исследования принимает врач. Высокие значения этих показателей являются основанием для проведения колоноскопии.

Чтобы сдать иммунохимический количественный анализ на гемоглобин в кале, трансферрин в кале, от пациента не требуется специфической подготовки, в том числе особой диеты. Если пациент принимает лекарственные средства, необходимо проконсультироваться с врачом о необходимости их отмены перед исследованием.

Сдать анализ на гемоглобин в кале, трансферрин в кале необходимо без применения клизм и слабительных средств. Стул для исследования должен быть получен без их применения.

Сдавать анализ на трансферрин в кале и фекальный гемоглобин не рекомендуется в течение 2 недель от момента проведения исследований и манипуляций, связанных с возможностью повреждения слизистой кишечника (ректоманоскопия, применение очистительных клизм и т.д.)

• Рак толстого кишечника и прямой кишки
• Мониторинг состояния кишечника после оперативного вмешательства
• Наследственный неполипозный колоректальный рак
• Семейный аденоматозный полипоз
• Полипы и подозрение на их наличие
• Хронические воспалительные заболевания кишечника, колиты
• Некротизирующий энтероколит, неспецифический язвенный колит
• Болезнь Крона и подозрение на нее
• Аутоиммунные заболевания
• Обследование членов семьи первой и второй степени родства, больных раком либо полипозом кишечника
• Скрининг для выявления колоректального рака лиц старше 40 лет (1 раз в год)

Высокие значения показателей гемоглобина и трансферрина в кале являются основанием для проведения колоноскопии.

) кровь является эффективным методом активного выявления пациентов, считающих себя практически здоровыми, но уже имеющих скрыто протекающую органическую патологию кишечника (рак, крупные полипы, язвы, эрозии и др.).

Основная цель проведения анализа кала на скрытую кровь - скрининг колоректальных полипов и рака, не дающих иных симптомов, кроме скудного, невидимого глазом, оккультного кровотечения . Этот анализ позволяет достоверно выявить пациентов группы повышенного риска, нуждающихся в проведении профилактического эндоскопического обследования кишечника - колоноскопии

Современным, избирательным и высокочувствительным является иммунохимический анализ кала на скрытую кровь . В отличие от общеизвестной, но устаревшей пробы Грегерсена, а также гваякового теста, иммунохимический анализ позволяет определять в кале исключительно гемоглобин человека и не требует соблюдения каких-либо ограничений питания.

Чтобы иммунохимическое тестирование на скрытую фекальную кровь стало более доступным в муниципальных поликлиниках, необходимо стремиться к минимизации затрат. Для снижения себестоимости иммунохимического тестирования и, соответственно, для увеличения доступности конечному потребителю целесообразно пользоваться тестовой системой Sentinel CH FOB Gold (Sentinel Diagnostics, Италия) - пока единственным продуктом на рынке лабораторной диагностики, который позволяет иммунологически определить человеческий гемоглобин в кале полностью автоматизированно в анализаторе клинической химии. Благодаря эксклюзивному дизайну пробирки для сбора образцов, которая может быть помещена в прибор так же, как и стандартная пробирка, размером 13x10 мм, Sentinel CH FOB Gold идеально подходит большинству современных биохимических анализаторов. Это означает, что клинико-диагностическим лабораториям необязательно менять свою систему, устанавливая дополнительные специализированные приборы для проведения всего лишь одного теста («Поликлиника». - №3. - 2011. - С.23-26).

В Саратове и Энгельсе современный иммунохимический анализ с помощью тест-системы FOB Gold можно пройти в Di центре : код услуги 13.904 Скрытая кровь в кале.

Одним из наиболее эффективных комбинированных иммунохимических тестов для скрининга рака кишечника является COLONVEW (Biohit, Финляндия). Подробная информация о тесте и самостотельному тестированию в домашних условиях представлена на сайте www.colotest.ru .

Комбинированная иммунохимическая тест-системая для определения в кале трансферрина и гемоглобина также позволяет проводить эффективный скриниг новообразований как верхних (пищевод, желудок, тонкая кишка), так и нижних (толстая кишка) отделов желудочно-кишечного тракта.

Компания ООО МЕД-ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКА разработала и внедрила в широкую практику высокочувствительный и специфичный тест «ИммуноХРОМ-ГЕМ-Экспресс» , предназначенный для одноэтапного быстрого качественного определения наличия гемоглобина (скрытой крови) в кале человека методом иммунохроматографического анализа.

Новый дизайн упаковки

Определение основано на принципе иммунохроматографии. Испытуемый образец всасывается поглощающим участком рабочей зоны планшета; при наличии в образце человеческого гемоглобина последний вступает в реакцию со специфическими моноклональными антителами к гемоглобину человека, связанными с частицами коллоидного золота, образуя окрашенный комплекс антиген-антитело. Этот комплекс движется с фронтом жидкости и вступает в реакцию с другими антителами, иммобилизованными на мембране в тестовой зоне планшета. В том случае, если концентрация гемоглобина в анализируемом образце превышает заданный пороговый уровень, то в тестовой зоне на уровне маркировок С (контроль) и Т (тест) выявляется по одной линии розово-фиолетового цвета.

Тестирование с помощью набора «ИммуноХРОМ-ГЕМ-Экспресс» легко выполняется пациентом самостоятельно в домашних условиях. Необходимо лишь чётко соблюдать инструкцию по применению!

Существующие ограничения для проведения иммунохимического тестирования на скрытую кровь в кале:

• Пробы кала нельзя отбирать во время или в течение трех дней после менструального периода, а также, если у пациента имеет место явное кровотечение из прямой кишки или кровь в моче.
• Алкоголь, аспирин или другие препараты, принятые в избытке, могут раздражать желудочно-кишечный тракт вплоть до возникновения эрозивно-язвенных поражений, являющихся причиной скрытого кишечного кровотечения. Поэтому необходимо прекратить прием этих веществ по крайней мере за 48 часов до тестирования.

Проведение иммунохимического анализа кала на скрытую кровь с профилактической целью можно рекомендовать 1 раз в год всем пациентам старше 40 лет.

Владимир Рубцов

Традиционно при анализе кала на скрытую кровь используется гваяковая проба (Guaiac - краситель, который позволяет использовать пероксидаза-подобную активность гемоглобина, чтобы запустить окислительную реакцию с получением синего цвета). Однако эта реакция неспецифична в отношении человеческого гемоглобина и имеет низкую чувствительность. Кроме того, ее проведение требует определенных ограничений в питании. Для преодоления этих недостатков был разработан количественный иммунохимический анализ кала на скрытую кровь. Однако пока мало работ, демонстрирующих его значение для диагностики колоректальных опухолей.

Методы и ход исследования.

В Израиле (Тель-Авив) амбулаторно обследованы 1000 пациентов. У некоторых из них не было жалоб, которые могли бы дать основание заподозрить колоректальную , однако имелись факторы риска развития такой патологии. У остальных пациентов имелись жалобы, которые можно было связать с патологией толстой кишки.

Перед забором стула больные принимали обычную для себя пищу без дополнительных ограничений. Всего у каждого больного отбирали 3 образца стула (по 1 при последовательных трех дефекациях).

Анализ кала на скрытую кровь проводили с помощью тест-системы OC-MICRO (компания Eiken Chemical, Япония). Из всех трех значений уровня гемоглобина у каждого больного для анализа выбирали наибольшее.

Колоноскопию проводили после забора указанных образцов стула. Данные колоноскопии служили в качестве референтного метода.

Оценивали чувствительность и специфичность количественного иммунохимического анализа кала на скрытую кровь, его соотношения вероятности. При этом использовали 2 порога для разграничения нормальных и патологических уровней гемоглобина в кале: 100 нг/мл (порог, рекомендованный производителем тест-системы) и 75 нг/мл (уровень, который, как полагали авторы, может повысить чувствительность теста в выявлении новообразований). К клинически значимым новообразованиям относили и и далеко зашедшие аденомы.

Результаты.

При колоноскопии ы обнаружены у 356 пациентов, в том числе, у 112 – размерами менее 10 мм; и обнаружены у 17 пациентов, и далеко зашедшие аденомы - у 74 больных.

Т.о., при понижении указанного порога с 100 до 75 нг/мл чувствительность действительно повысилась, однако специфичность снизилась. При использовании порога 100 нг/мл было не распознано 2 случая а, при использовании порога 75 нг/мл – только один. При уровне гемоглобина в кале >100 нг/мл в 60 случаях не было клинически значимых новообразований. Подобных случаев при пороге 75 нг/мл было 78; при последующем наблюдении за ними (в среднем 16, 4 мес.) у 1 больного обнаружен толстой кишки.

Уровень гемоглобина в кале оказался существенно больше у больных с колоректальным ом, чем у больных без новообразований; это различие наблюдалось при любой локализации и стадии а. Чем дистальнее располагался , тем выше был уровень гемоглобина в кале.